Monkeypox методы диагностики
Monkeypox virus (MPXV), smallpox и vaccinia все относятся к роду ортопедии. Monkeypox в основном передается людям грызунами, приматами и другими дикими животными, и имеет ограниченную передачу от человека к человеку, вызывая Редкие вирусные зоонотические заболевания-monkeypox. 1 сентября 1970 года в больнице Басанкусу в Конго были выявлены первые человеческие случаи пмхv. Monkeypox в основном передается людям грызунами, приматами и другими дикими животными, и имеет ограниченную передачу от человека к человеку, вызывая Редкие вирусные зоонотические заболевания-monkeypox. Клинические признаки monkeypox аналогичны признакам smallpox, но они более мягкие. Monkeypox главным образом произошло в отдаленных районах центральной и Западной Африки, где находится недалеко от тропических лесов. С адаптацией к людям MPXV постепенно превращалась в два клада: Центральный Африканский филиал (бассейн Конго) и Западный Африканский филиал. В их числе, отделение бассейна реки Конго имеет более сильную силу и трансформируемость.
Введение в MPXV
Monkeypox virus-это обволакированный двухжильный вирус DNA, который очень зависит от собственной клеточной DNA и репликации RNA и может реплицироваться в хост-цитоплазме. Похоже на вирусы того же рода, MPXV, скорее всего, Реплицирует морфологически отдельный внутриклеточный зрелый вирус (IMV) и Внеклеточный обволакивающий вирус (EEV) в хост-цитоплазме. Imv имеет прочную физическую структуру, которая облегчает передачу между хостами, в то время как более хрупкие EEVs обволакиваются и ограничивают иммунную очистку от хоста. Таким образом, EEVs более подходят для передачи вирусов в клетки. MPXV может эффективно заразить первичные моноциты человека, устраняя реакцию местных Т-клеток, ингибируя активацию клеток CD4 и CD8 T, чтобы избежать системного иммуносупрессии и иммунного мониторинга.
Клиническая диагностика вируса monkeypox
Лучшие диагностические образцы для monkeypox исходят из кожных повреждений: жидкости из пузырьков и пустулов и сухих корок. Образцы пролежней должны храниться в сухом, стерильном трубе (например, VTM) и храниться в холодном состоянии. Клиническая диагностика monkeypox должна учитывать другие сыпь, такие как ветряная оспа, корь, бактериальные кожные инфекции, чесотки, сифилис и связанные с лекарствами аллергии. Лимфаденопатия на ранней стадии болезни может быть единственной клинической особенностью, которая отличает monkeypox от ветряной оспы или оспы.
1. Биопсия электронного микроскопа
Под электронным микроскопом MPXV был кирпичной в цитоплазме, с боковыми телами, а центральное ядро было около 200-300 нм. Так как характеристики ОПВ морфологически неразличимы, этот метод не может подтвердить диагностику, но может предложить, что вирус относится к роду Poxviridae.
2. Обнаружение генов
2,1. В режиме реального времени флуоресцентный количественный ПЦР
Рутинное Обнаружение MPXV DNA на клинических Образцах и MPXV-инфицированных клеточных культур, с ПЦР или методом ПЦР в реальном времени. Обнаружение рекомендуется для выполнения на объекте уровня 3 biosafety. Метод ПЦР в реальном времени должен быть использован для обнаружения внешнего гена протеина конверта (B6R), гена полимеразы, сохраняемого региона E9L, DNA-dependent RNA polymerase subunit 18, rpo18 и F3L ген.
2,2. Длина ограничения фрагмента полиморфизма (RFLP)
ПЦР или ограничение длины фрагмента полиморфизма (релп) также может быть использован для обнаружения MPXV DNA, но RFLP является трудоемким и требует вирусной культуры. RFLP продуктов ПЦР также требует пищеварения, за которым следует электрофорез геля, который может быть не лучшим подходом в клинических условиях, где скорость, чувствительность и специфичность имеют критическое значение.
2,3. Технология секвенирования следующего поколения (NGS)
Секвенирование всего генома с методом NGS остается золотым стандартом для дифференциации характеристик MPXV и других ортопедов (OPV), но технология является дорогостоящей и нисходящей обработкой данных секвенирования требует огромной вычислительной мощности. Таким образом, НГС не может быть подходящим подходом в странах с ограниченным объемом ресурсов в странах Африки к субсахару. ПЦР в реальном времени по-прежнему является предпочтительным методом для обычной диагностики MPXV в технологии генного тестирования, но он должен быть дополнен технологией секвенирования на месте геном. Например, Oxford Nanopore MinION, он предоставляет данные о вирусном геноме в реальном времени, которые необходимы для научно обоснованного эпидреса.
3. Immuno assay
Monkeypox вирусы иммунный анализ в основном включают энзим-связанный иммуносорбент assay (ELISA) для обнаружения антител IgG/IgM и иммуногистохимическое Обнаружение вирусных антигенов. Иммунохимический анализ антител MPXV может отличить его от вируса герпеса. Антивирусные антитела и Т-клеточные реакции были виктимированы для увеличения во время начала болезни, С вирусом monkeypox IgM и IgG, обнаруженным в сыворотке вокруг 5 дней после начала сыпи и более 8 дней. Возможная инфекция мрхv должна быть диагностирована, если антитела IgM и IgG присутствуют в сыворотке непривитых людей с историей сыпи и тяжелой болезни. Положительный тест IgM ELISA показывает, что в последнее время воздействие MPXV, в то время как положительный тест IgG указывает на то, что человек ранее подвергался воздействию MPXV через прививку или естественную инфекцию. Наличие как IgM, так и IgG в одном образце указывает на раннюю прививку или воздействие на людей, естественно инфицированных MPXV. Тем не менее, ортопедические вирусы серологически реактивные, и антитела не дают подтверждения специфики monkeypox, но могут быть возможны для серологического тестирования в MPXV-эндемических областях.
RПримечание:
[1] Sarah Keasey, Christine Pugh, Александер Тихонов и др. Протеомическая основа реакции антитела на вирусную инфекцию Monkeypox, исследуемую в циномальгусных макакинах, и сравнение с прививкой человеческой оспы [J]. Plos one, 2010, 5(12): e15547.
[2] Emmanuel Alakunle, Ugo Moens, Godwin Nchind, et al.Monkeypox Virus в Нигерии: инфекционная биология, гигиена и эволюция [J]. Вирусы, 2020, 12(11):1257.
